线粒体分离技术支持,线粒体分离原理

大家好，今天小编关注到一个比较有意思的话题，就是关于线粒体分离技术支持的问题，于是小编就整理了3个相关介绍线粒体分离技术支持的解答，让我们一起看看吧。

1. 如何提取细胞中的线粒体？
2. 1. 线粒体提取分离过程中，为什么要在0～4℃进行？
3. 为什么位于线粒体上的基因不遵循自由组合定律？

如何提取细胞中的线粒体？

提取新鲜心肌组织细胞内线粒体的方案：心肌组织切碎后在4 ℃介质（0.25 mol/L蔗糖、10 mmol/L Tris-HCl pH7.4，0-4℃）中制备心肌组织匀浆。匀浆经750g、离心10 min后留上清，以9000 g离心20 min 后留沉淀，重新悬浮后以9000 g再离心20 min，弃上清得线粒体.全部操作于4 ℃进行。

培养细胞提取线粒体.细胞弃去培养液后，用细胞收集液作用2到3 min，用scraper,将细胞收集起来，6000 g离心15 min。

弃上清，之后加细胞匀浆液，用匀浆器或手动匀浆管匀浆，将装有匀浆液的离心管配平后放入普通离心机，以2500 rpm，离心15 min,缓缓取上清液，移入高速离心管中，保存于有冰块的烧杯中.以17000 rpm离心20 min，弃上清，留取沉淀物。

加入0．25mol/L蔗糖与0．003 mol/L氯化钙液l ml，用吸管吹打成悬液，以17000 rpm离心20 min，将上清吸入另一试管中，留取沉淀物，加入0.1ml 0．25mol/L蔗糖与0.003mol/L氯化钙溶液混匀成悬液.即得线粒体。

1. 线粒体提取分离过程中，为什么要在0～4℃进行？

线粒体干物质的主要成分是蛋白质。蛋白质在室温和高温环境下都难以长期保存。

低温环境能有效保持蛋白质的稳定性，包括结构和功能。

温度过高，线粒体里的蛋白可能变性而丧失活性等。

温度过低，虽然能有效保存蛋白质，但是低温导致膜结构脆性增大，提取过程中的物理机械剪切力可能使线粒体破损。

完整得提取线粒体要注意对线粒体的各个结构的保护。

为什么位于线粒体上的基因不遵循自由组合定律？

位于线粒体上的基因不遵循自由组合定律的原因是:

因为细胞质遗传的形状是由线粒体或叶绿体决定的，而线粒体和叶绿体都是半自主细胞器，具有独立的DNA。在细胞分裂过程中，细胞器是随机分配的，就像切一个鸡蛋，可能一半有很多蛋黄，一半却很少。所以细胞质遗传不遵循分离定律。在受精过程中，***几乎丢掉了绝大部分的细胞质，所以受精卵的细胞质来自于卵细胞，自然受精卵由细胞质决定的性状只由卵细胞决定，不遵循自由组合定律。

到此，以上就是小编对于线粒体分离技术支持的问题就介绍到这了，希望介绍关于线粒体分离技术支持的3点解答对大家有用。